本篇文章给大家谈谈被污染的细胞什么形态,以及受污染的细胞还能提蛋白吗对应的知识点,希望对各位有所帮助,不要忘了收藏本站喔。
细胞污染很多种,不同种细胞污染表现不同,可能检测方法不同。不过大部分污染用肉眼加镜检就可以解决。
细胞污染一般分细菌污染,真菌污染,支原体污染,黑胶虫等。
细菌污染:pH升高培养基变黄,培养基严重浑浊,镜下可见细菌游动;
真菌污染:培养液短期内多不浑浊,有肉眼可见漂浮物,镜下细胞间有菌丝体,生长变慢,时间长细胞死亡;
支原体污染:细胞生长一般无可见变化,可用支原体检测试剂盒检测支原体污染(现在市场上有卖,有检测支原体DNA的,灵敏度高但过程复杂;非检测DNA的过程简单)
黑胶虫:培养液不浑浊,细胞生长影响不大,镜下有小黑点做布朗运动;
发生污染,既耽误时间又是一个灾难,熟练的无菌操作能避免许多问题,但早期检测污染是一种可以预警的方法。对于培养箱中的每瓶细胞都要注意观察,要养成习惯,每次打开培养箱时,迅速看看有没有发生污染。
细菌、酵母、真菌、霉菌、支原体以及其他的培养细胞都可能引起污染。
怎样识别污染
一、肉眼观察 ,把培养瓶或培养皿拿起来,对着光线检查。
浑浊情况。 即使细胞密度很高,培养基也应该是透明的。轻轻移动或晃动培养瓶,观察培养基的浑浊或悬浮情况,一些霉菌可能会在培养基的表面形成菌落。
培养基颜色的变化。 酸性条件下,加了酚红的培养基会由红变黄,而碱性条件下会变成红紫色。细菌污染常常会使培养基变成黄色,真菌污染会使培养基变成深紫红色。
闻! 当然不能打开瓶子去闻,把鼻子贴在瓶口闻,许多污染发生以后都会散发出易察觉的、特殊的气味,甚至一打开培养箱门就闻到了。
二、显微观察 。在倒置显微镜下,先用低倍(10 X) 再用高倍(40 X) 物镜(总放大倍数为400) 观察细胞培养皿或培养瓶中的细胞:
其他有机体。 在低倍镜下,真菌的菌丝体成长棒状,并横穿整个视野,还可以观察到酵母,有时呈小圆球形,有时还有芽。
在高倍镜下可以观察到细菌,它们可能是棒状或球状,单独成链或成团存在,它们也可能和细胞混在一起,并且明显处于细胞内部,有些细胞可能已经裂解变得模糊。观察时可能每两个视野才出现一个污染(当然也算被污染了!),而且可能污染物是可以运动的。
损伤细胞。 感染会杀死细胞,可能导致每个细胞都裂解和/或细胞层从附着物上完全剥离,更可能的是细胞变得不规则(或大或小),在低倍镜下是黑色的粒状
悬浮培养细胞比贴壁培养细胞更加难以显微观察,尤其是高倍显微镜下。
将培养瓶或培养皿放在显微镜的载物台上,静置一会。
将焦距对准器皿的底部,观察那些轻微附着的细胞,因为它们可能已经接触到了微生物。
对准整个培养瓶焦距,当发现细胞的时候,用细聚焦调节旋钮调节,仔细检查周围的培养基有没有污染发生。
图一 倒置显微镜放大倍数400 倍下观察到的贴壁细胞被污染的情况
a 霉菌; b 酵母; c 细菌,小的棒状; d 细菌,成团的球状,有些细菌已经进入细胞内部。
如果你不能确定是否发生了污染
制作湿涂片或染色片。取1 ml 培养基离心,用50 μl 培养基或缓冲液重新悬浮细胞,滴一滴到载玻片,盖上盖玻片制成湿涂片;或涂片、固定并染色(甲基兰或革兰氏染液),在高倍镜下观察。
将细胞在营养培养基或琼脂培养基上划线, 37℃培养3 天。如果有菌落,那么细胞被污染了。
取1 ml 的细胞培养液至无菌的微量离心管中, 37℃培养3 天。观察到浑浊物,做湿涂片显微镜观察。
支原体污染细胞后.培养液可不发生混浊.多数情况下细胞病理变化轻微或不显著,细微变化也可由于传代、换液而缓解.因此易被忽视。但个别严重者,可致细胞增殖缓慢.甚至从培养器皿脱落。
细胞污染通常不会像结晶一样呈现出明显的晶体形态。细胞污染是指在细胞培养过程中,外来的细胞、病毒、细菌、真菌等微生物或其他异物进入细胞培养体系,对细胞生长、代谢、分化等产生不良影响的现象。
关于被污染的细胞什么形态和受污染的细胞还能提蛋白吗的介绍到此就结束了,不知道你从中找到你需要的信息了吗 ?如果你还想了解更多这方面的信息,记得收藏关注本站。
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