细胞污染的种类包括哪些（细胞污染的种类包括哪些）

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本文目录一览：

• 1、大家帮忙看看细胞有没有被污染
• 2、细胞培养，常见的真菌污染源有哪些
• 3、细胞培养中常见的生物污染类型有哪些
• 4、细胞污染的常见类型及预防措施

大家帮忙看看细胞有没有被污染

细胞污染很多种，不同种细胞污染表现不同，可能检测方法不同。不过大部分污染用肉眼加镜检就可以解决。

细胞污染一般分细菌污染，真菌污染，支原体污染，黑胶虫等。

细菌污染：pH升高培养基变黄，培养基严重浑浊，镜下可见细菌游动；

真菌污染：培养液短期内多不浑浊，有肉眼可见漂浮物，镜下细胞间有菌丝体，生长变慢，时间长细胞死亡；

支原体污染：细胞生长一般无可见变化，可用支原体检测试剂盒检测支原体污染（现在市场上有卖，有检测支原体DNA的，灵敏度高但过程复杂；非检测DNA的过程简单）

黑胶虫：培养液不浑浊，细胞生长影响不大，镜下有小黑点做布朗运动；

细胞培养，常见的真菌污染源有哪些

细胞培养，常见的真菌污染源有哪些

培养基变浑浊的原因可能有如下几点：

1、细胞存在污染，污染早期可以见到细胞生长；

2、不排除传代时细胞密度过大，或者操作不当导致多数细胞不贴壁，大量细胞漂浮。

3、细胞破碎。

细胞培养中常见的生物污染类型有7种,分别是细菌污染、支原体污染、原虫污染、黑胶虫污染、真菌污染、病毒污染以及非细胞污染.他们在细胞培养中污染的特点如下：

1、细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显.

2、支原体：黑色的,好象多为多形,培养液一般培养液一般会浑浊,原体感染,国内血清很多都没有做支原体阴性检测,而支原体是牛血清中最常见的微生物之一.而且它不能用过滤的办法除去.支原体感染细胞以后,细胞病变不很明显,只是慢慢死去.

3、黑胶虫：可以穿透滤膜,也可以通过空气传播,低倍下为黑色点状,高倍下可看见黑色的小虫游来游去,培养液也是不浑的,一般不会太影响,细胞还是可以用的.常常是细胞生长状态良好,且观测到的运动物无明显增多,且培养液颜色、透明度无明显变化,可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象.对细胞生长状态不会有明显影响,在细胞增殖旺盛之后会自然消失,除更换血清外无须特殊处理.

4、真菌：一般培养液清亮,不变色,镜下有丝状物,有些真菌开始很像死细胞碎片,只是它很多很多的小块很清楚,象珊瑚状,不象细胞碎片分不清,慢慢的会长出很细的黑色丝状物.真菌生长的比较慢,不象细菌那么容易被发现,但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了,也很难救活了.

5、原虫：培养液可轻微浑浊,显微镜下那些细小的点状物数量非常多,轻微活动,细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢,而且细胞状态不好,边缘不清楚,细胞不透亮.他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养.这种共生是非常普遍的,但他们的数量小,细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长,只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长,最终形成恶性循环.

6.病毒：组织细胞培养过程中,如果没有除去潜在的病毒,就会产生病毒污染.目前,从原代猴肾细胞的培养中已发现不少于20种血清性病毒.尽管病毒污染的细胞不影响原代培养,但生产疫苗是不安全的.因此,潜在病毒是细胞大量生产和疫苗、干扰素等生物制品制作中的难题 。

7、非同种细胞污染 ：即是细胞交叉污染,由于细胞培养操作时各细胞株所需的器材和溶液没有严格分开,往往会使一种细胞被另一种细胞污染.目前,世界上已有几十种细胞都被HeLa细胞所污染,致使许多实验宣告无效.非细胞培养物所造成的化学成分的污染也偶有发生,大多是由于细胞培养所需物品清洗消毒不彻底而带入一些有毒化学物质所致.

细胞培养中常见的生物污染类型有哪些

细胞培养中常见的生物污染类型有：细菌，真菌，病毒等微生物污染。

细胞污染的常见类型及预防措施

一、支原体污染

识别支原体污染。 这是一种很难发现却经常存在的问题。支原体是最小的(0. 3μ.m)能够自我复制的有机体，倒置显微镜下通常观察不到。支原体没有细胞壁，对常用的抗生素不敏感。支原体感染是极为不易察觉的，可能直到出现了可以观察到的病变或发现细胞正常功能丧失的时候，才意识到是发生了支原体感染。

不采用特殊的染色方法，也没有观察到病变但是实验总是不成功，就应怀疑被支原体污染。预防支原体污染的唯一途径是经常对细胞进行筛选。

防止支原体感染。 只使用那些证明没有污染支原体的血清和培养基，许多公司都作出了这样的保证。只接受那些保证没有支原体感染的细胞，通过商业手段得到的细胞很容易做到，但是从别处索要时就一定注意，要直接询问他是否验证过没有支原体感染。

对细胞进行日常的筛选是很重要的。虽然这样做很麻烦，但当你怎么样也得不到一种细胞表面蛋白的抗体，或不能有效地表达某种蛋白质时，可能是由于一直在使用被支原体感染的细胞。

检测支原体感染。 如果这株细胞对你十分重要，那么就应该每4~6 周对细胞进行检测，通常使用下面几种方法：

支原体的荧光染色 是最简单、最便宜也是最常用的方法。

使用支原体的特异引物进行PCR 检测 。如果实验室具备PCR 仪和电泳条件，那么这种方法可能是最简单的手段。可以自己设计引物（设计好恰当的对照），也可以从公司购买引物。

把细胞样品送到能进行支原体检测的公司检测 。这样做虽不如自己检测快（尽管托给公司比较容易，但会很贵），但你不需要自己动手。

如果你发现了支原体污染……祝你好运！

最好的方法是立即把细胞丢弃，重新复苏。

可以不理会它。

可以采取某些挽救措施，但是会很困难，只适用于那些不可代替的细胞。最简单的方法是订购除去支原体的试剂盒，并且联系公司咨询他们的意见。

二、交叉污染

细胞还可能被别的细胞污染，这种交叉污染可能更广泛，许多实验人员在不经意之间培养、使用和冻存了其他的细胞。

这种污染是可以避免的。

只从有保障的地方得到细胞 ，或者自己检查细胞，许多公司也可以检查。

不要同时操作多株细胞 。不要把多种培养瓶同时放在超净台内。

不要使用同一个移液管 操作多种细胞。

不同细胞株 不要使用同一瓶培养基 或胰蛋白酶。

操作后 不要把移液管放回培养基的瓶中 。

培养维护时， 使用栓塞式移液管 。

如果你的细胞生长情况或功能突然发生了变化，在排除支原体污染后，检查你的细胞是否发生了交叉污染（这些变化也可能是发生了突变或漂变） 。

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